| 欢迎来到医学会议网! 请登录   免费注册
主页 > 保健 > 生理疾病 > 医学课堂 > 胶质瘤侵袭迁移靶向治疗

胶质瘤侵袭迁移靶向治疗

2020-03-11 09:02 | 来源:未知 | 责任编辑:本站编辑

作者:李涛,海龙,杨学军,天津医科大学总医院神经外科

 

胶质瘤是中枢神经系统最为常见的肿瘤,其中以胶质母细胞瘤的恶性程度最高、侵袭性最强,占原发性中枢神经系统恶性肿瘤的46.1%。以胶质母细胞瘤为例,如果只接受支持性治疗,患者的中位生存期仅为12.1个月。

 

目前,以手术治疗为主,辅助放射治疗和药物化疗的治疗手段仅能有限地延长恶性胶质瘤患者的中位生存期。此外,相同病理类型和相同级别胶质瘤患者的预后也不尽一致,存在明显的个体差异性,而造成这种差异的关键因素是每一个体自身的生物学特性,尤其是基因分子水平的差异。

 

当今对于胶质瘤治疗方法的探索已从传统治疗方法(如外科手术结合术后同步放射治疗和药物化疗)逐渐转向以致病基因和调控分子等为靶点的靶向治疗。虽然,恶性胶质瘤存在遗传异质性,且可能起源于不同的起始细胞,但高度侵袭性是其共同的生物学特性,具有向多脑叶侵袭播散的特点,故无法通过外科手术最大程度地切除病灶,以及同步放射治疗和药物化疗完全消灭残留肿瘤细胞,这是造成传统治疗失败和肿瘤复发的重要原因之一。但是恶性胶质瘤高度侵袭的生物学特性也为靶向治疗提供了有力的治疗靶点和崭新的治疗策略,笔者将围绕胶质瘤的侵袭迁移特性,多角度阐述其相关分子机制与靶向治疗策略。

 

1.针对胶质瘤侵袭迁移靶向治疗的尝试

 

鉴于胶质瘤的高度侵袭性,近年来越来越多的药物研发将关注点从抑制肿瘤细胞增殖转向抑制肿瘤细胞侵袭迁移,地诺单抗(denosumab)、西仑吉肽(cilengitide)、达沙替尼(dasatinib)和塞卡替尼(saracatinib)等药物均是针对肿瘤迁移的新型靶向药物,目前已进入临床前试验或临床试验。其中,西仑吉肽是一种针对αvβ3和αvβ5整合素的环状抑制剂,也是目前最具应用前景的抗肿瘤转移药物。整合素是由α和β亚单位组成的受体,可通过调控肿瘤细胞与细胞外基质(ECM)的黏附而影响新生血管的形成、细胞增殖和侵袭迁移。

 

有研究显示,胶质瘤灶边缘组织广泛表达αvβ3和αvβ5整合素,后者与胶质瘤的恶性程度呈正相关。临床前试验业已证实,西仑吉肽单药或多药联合应用均具有阻止肿瘤细胞转移的功效,并可阻止胶质瘤细胞的增殖和侵袭。然而,有关胶质瘤的Ⅲ期临床试验结果表明,西仑吉肽对延长患者总生存期(OS)无效。临床试验的失败并不代表整合素对胶质瘤细胞侵袭迁移通路无抑制作用,可能与西仑吉肽半衰期过短,难以有效发挥其药物作用有关。

 

2.体内外靶向抑制胶质瘤侵袭迁移研究

 

目前,经体外培养的肿瘤细胞模型主要用于研究胶质瘤侵袭迁移,但是体外实验并不能完全模拟肿瘤细胞在体内的生存环境,而且颅内种植实验也无法实时观察肿瘤细胞形态及侵袭速度,笔者拟结合本实验室研究项目,介绍两种体外模拟体内侵袭迁移研究模型。

 

2.1改良三维脑片培养模型在胶质瘤侵袭迁移研究中的应用

 

1991年,Stoppini等首次将脑片培养模型用于中枢神经系统疾病研究,其后的研究者采用活体脑片与胶质瘤细胞长期共培养,以模拟体内肿瘤细胞侵袭环境。改良三维脑片培养模型则是将携带有绿色荧光蛋白(GFP)的胶质瘤细胞制备成荧光细胞球接种于脑片表面进行共培养,通过荧光显微镜观察不同时间点胶质瘤细胞在脑片表面的迁移面积,据此推测其侵袭能力。

 

改良三维脑片培养模型不仅可以模拟体内侵袭迁移环境,还可以利用荧光显微镜无创性检测标记有绿色荧光蛋白的胶质瘤细胞数目;此外,还可用于抗肿瘤细胞侵袭迁移药物的筛选,通过抑制胶质瘤细胞相关运动蛋白,检测不同药物对胶质瘤细胞侵袭能力的影响,从而筛选具有抑制胶质瘤细胞侵袭迁移能力的药物。虽然,改良三维脑片培养模型可以模拟胶质瘤细胞侵袭迁移时游走于各类神经细胞(如神经元和神经胶质细胞)或神经组织的过程,但难以真正模拟肿瘤细胞生长所需的微环境成分,诸如各类细胞因子和血管结构等。

 

2.2三维水凝胶胶质瘤侵袭模型

 

三维水凝胶胶质瘤侵袭迁移模型是将胶质瘤细胞与基质、骨架和各种细胞因子按比例于体外共培养,观察在模拟体内微环境下胶质瘤细胞的侵袭迁移能力。该模型采用的三维Life水凝胶是以马来酰亚胺基-葡聚糖(maleinide-dextran)为支架系统、聚乙二醇-基质金属蛋白酶(MMPs)多肽(CD-link)为交联剂,交联形成三维网格系统,其中MMP多肽结构可被肿瘤细胞分泌的金属蛋白酶降解,以满足肿瘤细胞运动与增殖的需要。

 

目前所采用的二维肿瘤细胞培养技术,由于缺乏由细胞基质构成的立体结构,在培养过程中易使细胞形态或结构发生改变,导致肿瘤细胞的一些特定表型消失,造成肿瘤细胞生物学性状和基因表型与原代组织细胞差异;而且肿瘤细胞在二维培养条件下也无法体现间质运动和变形虫样运动的特点。尽管动物模型能够更为准确地反映肿瘤发生发展及侵袭迁移,但难以进行细胞、蛋白质和基因等微观研究,而三维水凝胶胶质瘤侵袭迁移模型可以模拟胶质瘤细胞与细胞间质的相互作用过程,便于研究肿瘤细胞黏附、侵袭及迁移过程。三维水凝胶胶质瘤侵袭模型不仅保留了动物模型和二维体外细胞培养的优点,同时为肿瘤细胞生长构建了与体内微环境相似的体外培养条件,是研究胶质瘤细胞侵袭迁移能力的理想模型。

 

3.胶质瘤侵袭迁移标志物靶向抑制研究

 

胶质瘤的侵袭迁移过程受多种信号转导通路的调控,是一种十分复杂的相互作用网络。针对肿瘤细胞信号转导通路上的特异分子进行靶向治疗,是目前胶质瘤研究的热点,而且越来越多的研究更为关注侵袭迁移相关通路的靶向抑制。

 

3.1针对细胞运动相关蛋白的靶向抑制

 

细胞运动能力是胶质瘤细胞侵袭迁移的基础,细胞运动涉及多种蛋白质分子及信号转导通路,如从参与细胞骨架组装的肌动蛋白相关蛋白2/3复合物(Arp2/3)、皮质肌动蛋白(Cortactin)、LIM激酶1(LIMK1)到Abelson2(ABL2,又称Arg)及Rho家族蛋白(Rac1、RhoA)等。胶质瘤细胞前端片状伪足的形成在细胞运动过程中起着至关重要的作用,其中,Arp2/3能够定位于肌动蛋白丝的侧面,从而诱导肌动蛋白分支的形成,随着肌动蛋白分支的延长,与其相对应的细胞质膜即形成片状伪足,在不同级别胶质瘤患者的脑组织切片中均有Arp2/3表达,随着胶质瘤恶性程度的增加,Arp2/3表达水平亦逐渐升高。Arp2/3特异性抑制剂CK666可使胶质瘤细胞伪足结构消失,并抑制其运动和侵袭迁移能力。

 

Cortactin是丝状肌动蛋白(F-actin)结合蛋白,可调控Arp2/3复合体的激活,在肌动蛋白相关运动中扮演重要角色,与Arp2/3相似,Cortactin表达水平与胶质瘤的病理级别呈正相关(P=0.000)并与Arp2/3共同定位于胶质瘤细胞伪足,降低胶质瘤细胞系中Cortactin表达水平,抑制胶质瘤伪足的形成和侵袭迁移能力。作为细胞运动下游通路的重要分子,即Rho家族中的Rac1,主要发挥分子开关功能并调控一系列细胞运动,可通过激活丝切蛋白(Cofilin)阻断肌动蛋白微丝末端的帽蛋白,而调控肌动蛋白骨架的重组;同时还可调控LIMK1的磷酸化,LIMK1通过磷酸化和失活Cofilin而参与对F-actin细胞骨架动力学的调节。

 

虽然,LIMK1对Cofilin切割F-actin具有抑制作用,但细胞运动是F-actin被切割和组装交替进行的过程,也是F-actin动态重组的过程。因此,抑制胶质瘤细胞LIMK1的表达亦可以抑制其伪足的形成和侵袭迁移能力。ABL2/Arg非受体酪氨酸激酶主要参与Arp2/3与Cortactin复合体的形成,同时将上游的磷酸分子传递至Cortactin,参与F-actin的切割与重组,胶质瘤细胞系中的沉默ABL2基因具有抑制其侵袭迁移的能力,而胶质瘤侵袭性伪足同样是介导胶质瘤侵袭行为的重要因素。ABL2参与胶质瘤细胞侵袭性伪足的形成,沉默ABL2基因抑制下游Cortactin的磷酸化,进而阻碍胶质瘤细胞侵袭性伪足的形成。

 

3.2细胞运动形式的转换

 

单细胞的侵袭迁移方式包括间质运动和变形虫样运动,Rac1与RhoA信号转导通路之间具有相互拮抗的特点,间质运动和变形虫样运动随着这两种信号转导通路的拮抗相互转换,因此,抑制上述信号转导通路即可诱导这两种运动形式的互相转换。本实验室通过对三维水凝胶胶质瘤侵袭模型的观察发现,Rac1抑制剂NSC23766可使胶质瘤细胞发生间质-变形虫样运动转换(MAT),由于变形虫样运动速度较快,与空白对照组相比,经NSC23766处理过的胶质瘤细胞的运动距离和运动速度均显著增加;Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)是RhoA的主要下游效应子,而在ROCK1抑制剂Y-27632的作用下,胶质瘤细胞则可发生变形虫样-间质运动转换(AMT),由于间质运动呈慢运动方式,与空白对照组和NSC23766处理组相比,Y-27632处理组胶质瘤细胞的运动距离和运动速度同时降低,而NSC23766和Y-27632联合应用组胶质瘤细胞无论运动距离还是运动速度均明显降低。

 

基于三维水凝胶胶质瘤侵袭模型构建的胶质瘤细胞侵袭迁移模型,以调控单细胞运动的关键分子Rac1和RhoA为靶向,抑制Rac1信号转导通路,使胶质瘤细胞发生间质-变形虫样运动转换,而抑制RhoA信号转导通路时,胶质瘤细胞则出现变形虫样-间质运动转换,表明单独抑制间质运动或变形虫样运动中的一种运动方式,无法改变胶质瘤细胞侵袭迁移的特性,唯有同时抑制上述两种运动方式,才能有效降低胶质瘤细胞的侵袭迁移能力,提示Rac1与RhoA联合靶向治疗可作为控制胶质瘤播散的策略。

 

3.3离子通道与酸碱微环境

 

细胞内各类离子通道均参与机体的多种病理生理学过程。其中,钙离子信号转导通道异常与恶性肿瘤细胞侵袭迁移行为密切相关,主要是通过影响钙调蛋白(CaM)、富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)、S-100蛋白(S-100)家族等下游相关蛋白的生物活性,而调控细胞黏着斑的周转、细胞骨架的重构等肿瘤细胞运动等相关环节。有研究显示,由钙池调控的钙离子内流(SOCE)参与胶质瘤细胞的侵袭迁移,而钙离子释放所激活的钙离子信号转导通道蛋白1(Orail1)和基质相互作用分子(STIM1)对SOCE具有协同调控作用;Orail1在高级别胶质瘤细胞中呈高表达,SKF96365或敲低Orail1表达水平可以抑制胶质瘤细胞系的侵袭迁移能力。此外,Pyk2磷酸化有促进胶质瘤黏着斑周转的作用;而Orail1可通过上调Pyk2磷酸化水平,促进胶质瘤黏着斑的周转,同时还可促进胶质瘤细胞的上皮间质转化(EMT),从而加强胶质瘤细胞的迁移运动。

 

CaM和S-100A4蛋白同属钙结合蛋白,拥有EF-手型结合域,可以与钙离子相结合而激活下游的蛋白激酶和离子通道,敲低S-100A4表达水平,显著抑制胶质瘤细胞的侵袭迁移能力。在胶质瘤细胞运动过程中,CaM可在表皮生长因子(EGF)的诱导下出核,与细胞质中侵袭性伪足相关蛋白钠氢反转运蛋白1(NHE1)和Src蛋白相结合并使其激活,诱发侵袭性伪足形成和肿瘤细胞侵袭迁移。此外,由细胞外酸化和细胞内碱化所致的细胞内外pH值梯度反转是肿瘤代谢微环境的重要特征之一,NHE1广泛存在于各种细胞膜上,是调节细胞内外酸碱平衡和细胞体积的重要蛋白质。

 

CD44是由细胞膜表达的糖蛋白,其胞外域可作为胞外骨桥蛋白、透明质酸的受体,是影响胶质瘤细胞侵袭迁移能力的重要监测指标之一;酸性微环境可使CD44表达水平升高,促进胶质瘤细胞的侵袭迁移。钠钾氯共转运体1(NKCC1)在恶性胶质瘤中呈高表达,与胶质瘤的恶性程度密切相关,可调节胶质瘤细胞体积的大小,在NKCC1的作用下胶质瘤细胞体积缩小,易穿过狭窄的细胞外间隙向远隔部位迁移播散。此外,NKCC1尚可调节肿瘤细胞骨架,在促进胶质瘤细胞体积转换的同时,可以通过激活Rac1和RhoA,从而诱发上皮间质转化,加强胶质瘤细胞的侵袭迁移能力。

 

3.4SDF-1/CXCR4介导的趋化运动

 

趋化因子是一类具有促炎症趋化性的小分子细胞因子,与其受体结合后可诱发免疫反应、稳定内环境、促进血管生成、增强细胞黏附,以及干细胞存活。趋化因子CXCL12亦称为SDF-1,其受体为CXCR4,随着胶质瘤恶性程度的增加二者表达水平亦逐渐升高。组织病理学研究显示,在肿瘤中心的血管内皮细胞和坏死区域周围的细胞均可见表达阳性的SDF-1,CXCR4则主要表达于血管周围细胞和坏死区周围细胞,坏死区周围细胞SDF-1和CXCR4表达水平升高,提示缺氧可能是微环境SDF-1和CXCR4表达升高的原因。

 

在胶质母细胞瘤微环境中,SDF-1可与胶质瘤细胞表达的CXCR4结合,从而提高胶质瘤细胞MMP-9分泌水平、增强胶质母细胞侵袭性。此外,在SDF-1的诱导下,还可促进胶质瘤细胞Rac1的激活,并诱导Rac1聚集于细胞运动前缘胞膜下,促进伪足的形成。位于细胞核前120°扇形范围内的高尔基体对肿瘤细胞的运动方向具有指向作用,尽管体内微环境复杂,细胞运动方向杂乱,但是在肿瘤组织坏死区周围组织中,大多数胶质瘤细胞的高尔基体均位于细胞核背向坏死区一侧,而在坏死区以远的肿瘤组织中,高尔基体杂乱无章,无规律排列,证实由非坏死非缺氧区血管内皮细胞分泌的SDF-1,可诱导在缺氧微环境中高表达CXCR4的肿瘤细胞逃离缺氧坏死区。

 

3.5靶向胶质瘤干细胞侵袭

 

迁移胶质瘤干细胞(GSCs)被认为是一群具有自我更新、无限增殖、多向分化能力的肿瘤细胞,决定胶质瘤的侵袭性及对放射治疗和药物化疗的抵抗性,而向胶质瘤周围组织侵袭和迁移的干细胞也被认为是术后复发的“种子细胞”。胶质瘤干细胞中的CD133+细胞高表达Rac1,且表达水平显著高于CD133-细胞,而Rac1抑制剂可抑制胶质瘤干细胞的侵袭和迁移能力。此外,在胶质瘤干细胞维持其表型的过程中,Notch1信号转导通路活化为关键环节;基因沉默Notch1表达或通过Notch1通路抑制剂抑制其活性,不仅可以使磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)通路活性降低,而且胶质瘤干细胞的侵袭迁移能力亦明显下降,表明Notch1通路活化后需经PI3K通路调节胶质瘤干细胞的迁移和侵袭。

 

本实验室研究结果显示,Notch1通路对于胶质瘤干细胞自我更新和侵袭迁移的调控是通过SDF-1/CXCR4轴实现的,Notch1和CXCR4均聚集表达于胶质母细胞瘤干细胞球的外缘,并且与干性标志物CD133、巢蛋白(Nes)、少突胶质细胞转录因子-2(Oligo-2)以及性别决定区Y盒-2(SOX2)共表达于胶质瘤干细胞;Notch1通路通过激活SDF-1/CXCR4轴,进而激活丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路,最终实现对胶质瘤干细胞侵袭迁移的调控。

 

3.6表观遗传分子开关

 

肿瘤细胞的增殖与其运动密切相关。早在1996年即有学者提出了肿瘤细胞的“goorgrow”假说:当肿瘤细胞所处的局部微生态环境不利于肿瘤细胞增殖时,肿瘤细胞会迁移至适宜其生存和增殖的环境,并在适宜的微环境中进行增殖与迁移表型转换,启动相应生物学变化。肿瘤细胞的运动与增殖表型转换不仅受外部因素的影响,而且在细胞增殖和细胞运动两种表型复杂的分子和信号转导通路调控之间,其细胞内还同时存在一个调控表观遗传的开关。研究表明,在进行迁移运动的胶质瘤细胞中微小RNA-451(miRNA-451)表达水平明显下调,后者主要发挥调节肝激酶B1(LKB1)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号转导通路作用,可使胶质瘤细胞在不同葡萄糖环境中分别表现为增殖表型或迁移运动表型。

 

miRNA-451可增强胶质母细胞瘤哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)活性、抑制AMPK和Rac1被激活,进而实现胶质瘤细胞增殖-迁移表型的转换;与之相对,若在缺氧、低能量等微环境中,胶质瘤细胞miRNA-451呈低表达,则将促进AMPK发生磷酸化,进一步激活Rac1,从而使胶质瘤细胞获得更强的迁移能力,进而逃离这种不利于生长的微环境,发生远隔部位转移。

 

4.展望

 

近年来,免疫治疗在肿瘤研究领域取得重大突破,颇具应用前景。2015年,Nature报道了Louveau等的最新研究结果:人类大脑可通过脑膜淋巴管与外界免疫系统相通。这项重大发现彻底改变了人类对神经-免疫相互作用的认知,对神经疾病的研究和治疗具有重要影响,也为胶质瘤免疫治疗的可行性奠定基础。

 

免疫系统与肿瘤侵袭迁移是否相关?研究表明,肿瘤细胞转移是由于染色体的不稳定性驱动,而高度不稳定的染色体可以主动激活肿瘤细胞基因组中的炎症反应相关通路,使其表现出免疫细胞的特点并获得转移能力,这样肿瘤细胞就可以逃避免疫系统的监视,向远处转移播散。长期以来,对胶质瘤侵袭迁移的研究忽略了其中的免疫因素,而免疫系统对远处播散的肿瘤细胞“视而不见”恰是肿瘤细胞能够侵袭迁移的重要基础。因此,有理由相信肿瘤免疫学研究与肿瘤细胞侵袭迁移研究相结合,将是今后胶质瘤研究的重要课题。

 

来源:李涛,海龙,杨学军.胶质瘤侵袭迁移靶向治疗[J].中国现代神经疾病杂志,2019,19(11):819-825.


(本网站所有内容,凡注明来源为“医脉通”,版权均归医脉通所有,未经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,否则将追究法律责任,授权转载时须注明“来源:医脉通”。本网注明来源为其他媒体的内容为转载,转载仅作观点分享,版权归原作者所有,如有侵犯版权,请及时联系我们。)

上一篇:术后认知功能障碍的炎症病因学研究进展
下一篇:重视去骨瓣减压术后脑积水的特殊性

启示:本站所刊部分图文来源于网络,作者姓名及地址不详,请相关作者与本站编辑部联系,以便奉寄稿酬。
投稿、删稿及商务合作,请致电:0791-83888888、qq:2096788888、邮箱:tougao@jthysh.com。

寻医问药,问问邵大夫就知道!(只需注册,10分钟即可回答)



患友交流

13,865篇看病经验

更多>>
小孩5岁了经常不拉大便
2017-07-22 回复() | | 评论
手起倒刺指甲变形是什么原因?宝宝可能是存在缺锌、缺钙的情况,建议及时给宝宝检查一下微量元素看看。在进行微量元素的检查之后,根据情况适当的进行补充,此外出现倒刺时需要注意避免经常的使用手指牵拉,以免造成皮肤的损伤,导致出现炎症感染
2017-07-22 回复(1) | | 评论
包皮过长要怎么办呢?必须要手术吗?包皮过长易引起包皮垢存留,可能引起龟头炎,也是很多妇科疾病的诱发因素之一。包皮过长一般建议手术治疗,包皮环切术操作简单,恢复较快,是常用手术。或者用环切缝合器,手术效果也较好。如果暂时不手术可经常翻开
2017-07-22 回复(1) | | 评论
经常流鼻血是不是上火?根据您所说的情况来看,流鼻血,中医叫鼻衄病,除了因肺火、肝火、胃火上逆引起以外,另外气虚不摄,气不摄血也可能引起此病。建议作一下鼻腔镜、血常规等相关检查排除器质性疾病后经中医师把脉看舌等检查并诊断为气
2017-07-22 回复(1) | | 评论
宝宝吃奶粉大便不成形要怎么办呢?孩子出现的症状可能是患有乳糖不耐症,由于母乳中含得乳糖浓度太高,导致孩子的大便次数多,且不成形等,但孩子的食欲、睡眠、精神等一般情况都好。建议你将孩子的大便或母乳带去医院化验,以确诊。可以给孩子喝低乳
2017-07-22 回复(1) | | 评论
每天早上刷牙的时候都会恶心与呕吐,是什么原因?根据你的描述初步考虑为咽炎的可能性较大,建议注意饮食,禁食辛辣生冷食物。
2017-07-22 回复(1) | | 评论
胃寒能不能吃萝卜、吃了有什么害处吗?吃萝卜可起到一个顺气,健胃,清热解毒的我,日常可用猪排骨,年肉炖萝卜汤喝,不管是白萝卜,还是红萝卜都适合女性多吃,但因为白萝卜属寒凉之物,因此对于有胃寒的女性不要多吃、有胃寒要注意的是平时要注意保暖、
2017-07-22 回复(1) | | 评论
咳嗽时有小便憋不住要怎么办呢?咳嗽小便会夹不住这种情况属于应力性尿失禁,是由于尿道括约肌松弛,当患者咳嗽、大笑、打喷嚏等使腹压突然升高时,尿液可不自主排出,多见于中老年人尿道括约肌退行性变引起,可以进行骨盆底肌肉训练来缓解。另外可
2017-07-22 回复(1) | | 评论
乳房感觉有肿块需要做什么检查呢?你这种情况考虑为乳腺增生的可能,建议你去医院乳腺科做个乳腺B超检查,根据结果再对症治疗。最好是在月经后的3-7天去检查,这样结果更精确点。另外要保持心情愉悦,避免生气发怒。
2017-07-22 回复(1) | | 评论
远视散光弱视按摩有效果吗?远视散光弱视按摩有效果,不过还需要验光配镜的,儿童有视疲劳,不管散光度数大小,都需要散瞳验光,配戴适宜的矫正眼镜。原则上全部散光度数都要矫正。
2017-07-22 回复(1) | | 评论

我来说两句

对《胶质瘤侵袭迁移靶向治疗》进行评论已有条评论,查看评论

验证码:
看不清?点击更换
点击图片更换
匿名?
 发表评论后需要审核才可显示

权威专家观点

关注家人健康,远离烟草危害

家庭医生报

专题精选